Как отмечалось, современный алгоритм диагностики вариантов острых лейкозов включает морфологический, цитохимический, иммунологический и цитогенетический, а иногда и молекулярно-биологический подходы. В то же время следует подчеркнуть, что морфологическая оценка состава пунктата является базовой при диагностике острых лейкозов.
Без подсчета миелограммы и анализа морфологических и цитохимических особенностей клеток лейкемического субстрата нельзя интерпретировать данные иммунологического и цитогенетического исследований.
Диагностическая ценность каждого метода для разных вариантов различна. Так, морфоцитохимическими методами можно охарактеризовать большинство вариантов (до 90 %) M1—М5 острого нелимфобластного лейкоза. Однако М0, М7 и часть случаев М6 диагностируются только иммунологическим методом, так же как и острый лимфобластный лейкоз.
Применение иммунофенотипирования для диагностики острых лейкозов с помощью панели МКА позволяет определить линейную направленность и/ или этап дифференцировки бластов начиная с уровня стволовых предшественников до зрелых форм. Оно производится с помощью проточных анализаторов или на мазках костного мозга пероксидазно-антипероксидазным (РАР) или фосфатазно-антифосфатазным (АРАР) методом.
Каждый из методов имеет свои преимущества. Использование проточного анализатора позволяет получить данные о десятках тысяч клеток в лейкемической популяции, исследование клеток на мазках дает возможность сочетать иммунологическое исследование с морфологическим и цитохимическим.
Методические подходы при острых лейкозах
Широко принятый в настоящее время иммунологический подход расширяет наше понимание биологии бластных клеток при острых лейкозах. Появление новых МКА позволяет выделять дополнительные субтипы бластов. В частности, применение нового антимоноцитарно-макрофагального МКА D11 (CD68) дало возможность выявить миелоидную дифференцировку в клетках, расцениваемых ранее как недифференцированные. Данные, полученные при исследовании механизмов апоптоза, сыграли важную роль в изучении прогноза острого лимфолейкоза.
Существует точка зрения, что вариант лейкоза можно установить только на основании иммунологических критериев, не используя морфоцитохими-ческие данные. Этот подход в настоящее время не нашел поддержки, так как определяющей специфичностью обладают только МКА к миелоперокси-дазе и лизоциму, а все остальные антигены не столь специфичны.
Все большее значение в изучении патогенетических механизмов острого лейкоза приобретают молекулярно-биологические методы. Ряд наблюдений уже используется в практической медицине для диагностики вариантов острого лейкоза. Исследование перестройки генов иммуноглобулинов и Т-клеточных рецепторов играет важную роль в дифференциальной диагностике лимфопролиферативных заболеваний.
Характеристика аномалий кариотипа при остром промиелоцитарном и миеломонобластном с эозинофилией лейкозах с учетом данных цитогенетического исследования и PCR-реакции позволяет установить субвариант лейкоза и определить прогноз заболевания.
