Фильтрация эритроцитарной массы. Эритроцитная взвесь размороженная и отмытая
Установлено, что причиной большинства трансфузионных реакций негемолитического типа у больных, имевших в анамнезе множественные трансфузии компонентов крови, а также у женщин, имевших беременности, являются изоантитела к антигенам лейкоцитов (в частности, HLA), которые, несомненно, снижают эффект не только перелитого компонента, но и всей лечебной процедуры.
В среднем в 450—500 мл консервированной крови или эритроцитов содержится (2—3) х 10 лейкоцитов и большое количество тромбоцитов. Стандартный фильтр крови с диаметром пор 170 мк не задерживает и не удаляет лейкоциты.
В отделениях трансфузиологии или на станциях переливания крови лейкоциты и тромбоциты могут быть удалены из консервированной крови или ЭМ методом отмывания (центрифужным или на специальных автоматических машинах). Размороженная ЭМ, готовая к использованию, также практически не содержит лейкоцитов и тромбоцитов.
Однако, как было сказано выше, срок хранения отмытых эритроцитов в солевом растворе — всего 24 ч. Кроме того, в отмытой солевым раствором ЭМ через 24 ч увеличивается уровень свободного гемоглобина, т. е. происходит гемолиз эритроцитов, который нарастает с течением времени и к третьему дню более 35—40 % эритроцитов разрушаются. Срок жизни отмытой ЭМ можно увеличить до 3—4 и более суток, если в пакет после отмывания сразу добавить (при условии выполнения всех процедур в условиях, обеспечивающих стерильность) 50—100 мл раствора модежеля — декальцинированный модифицированный желатиноль.
Удаление лейкоцитов с целью профилактики сенсибилизации пациентов, получающих компоненты крови, можно обеспечить использованием специальных лейкоцитарных фильтров. Приказ министра МЗ РФ № 311 от 04.08.2000 предписывает внедрение в практику лечебно-профилактических учреждений и учреждений службы крови методов фильтрации трансфузионных сред. Лейкоцитарные фильтры позволяют удалять более 99 % лейкоцитов.
Лейкоцитарные фильтры применяют для подготовки эритроцитарной массы:
• больным, имеющим антилейкоцитарные антитела вследствие сенсибилизации предыдущими гемотрансфузиями;
• женщинам, имевшим многократные беременности,
• в целях профилактики больным, которым планируются многократные трансфузии компонентов крови.
Использование лейкоцитарных фильтров позволяет значительно уменьшить число посттрансфузионных реакций негемолитического типа и тем самым повысить эффект лечебных процедур.
Размороженная и отмытая эритроцитная взвесь
Наряду с консервированием крови при положительных температурах существует метод консервирования компонентов крови при отрицательных температурах.
Метод замораживания и хранения эритроцитов при низких температурах позволяет получить после размораживания и отмывания функционально полноценные эритроциты. Для предотвращения гибели или повреждения клеток при замораживании к ним в определенных соотношениях добавляют специальные химические агенты (криопротекторы, например: глицерин), которые при оттаивании эритроцитов должны быть удалены. Как правило, к замораживанию подготавливают ЭМ малых сроков хранения (не более 5—6 суток). Замораживание ЭМ в растворе глицерина выполняют в специальных металлических сосудах при низких температурах: —65 или —200 °С. Температурный режим и программа замораживания зависят от концентрации криопротектора. В замороженном состоянии эритроциты могут находиться до 10 лет.
После оттаивания эритроцитарной массы отмывают специальными растворами от глицерина и ресуспензируют в физиологическом растворе. Готовая к употреблению ЭМ должна иметь гематокрит в пределах 70—80 %. Поскольку часть процедур при приготовлении отмытых размороженных эритроцитов происходит в условиях разгерметизации стерильных систем, то срок хранения готовой продукции — не более 24 ч при +1—6 °С.
Метод замораживания эритроцитарной массы позволяет накопить и хранить продолжительное время эритроциты доноров редких групп крови и достаточно оперативно представлять их после размораживания и отмывания тем пациентам, которые в них нуждаются.
Возможность сохранять функционально полноценные эритроциты более длительно, чем при обычных условиях, открыло возможность дробно заготавливать, замораживать и хранить достаточные объемы аутологичной крови, которую используют в период операции для самого больного. Имеются сведения о целесообразности применения метода замораживания, хранения ЭМ доноров, не имеющих антител к цитомегаловирусам, для трансфузии больным, которым переливание компонентов крови, содержащих ЦМВ, противопоказано (иммунокопрометированные больные; пациенты, готовящиеся к трансплантации органов и тканей).
Возможность замораживать и хранить достаточно большие объемы аутоэритроцитов позволяет использовать этот метод для хранения сколь угодно долгое время эритроцитов людей, чья профессия связана с риском механической, химической или радиационной травмы.