Влияние Иммуновак-ВП-4 на мононуклеары. Иммунофенотип лейкоцитов под действием иммуномодуляторов
Важным показателем действия иммунопрепаратов на эффекторные механизмы врожденного иммунитета и направленность развития адаптивного иммунитета является оценка субпопуляционной структуры лимфоцитов. В настоящее время мало изучены сложные механизмы иммунных ответов при введении комплексных вакцин, направленных на повышение естественной резистентности. В этой связи, было оценено влияние поликомпонентной вакцины Иммуновак-ВП-4 на иммунофенотип МЛ селезенок мышей линии СВА
Мышам однократно, внутрибрюшинно вводили Иммуновак-ВП-4 в дозе 400 мкг. Через различные интервалы времени (4, 24, 48, 72, 120 ч) после вакцинации у мышей выделяли МЛ селезенки. В каждой группе (на каждый срок наблюдения) было использовано по 10 животных.
Полученные данные показывают, что после введения Иммуновак-ВП-4 происходит быстрое увеличение содержания CD4-T-лимфоцитов, естественных киллеров, СD8-цитотоксических лимфоцитов, наибольшие значения которых выявляли через 24 часа после иммунизации в популяции МЛ. Такую же динамику имеют CD25- и МНС-экспрессирующие клетки. При этом количество клеток, экспрессирующих МНС II значительно больше, чем МНС I.
В условиях данного эксперимента высокий уровень экспрессии CD4 и МНС II прослеживался более продолжительное время (4-120 ч — срок наблюдения) по сравнению с CD8 и МНС I. Об активации процессов пролиферации и дифференцировки лимфоцитов свидетельствует также усиление экспрессии рецептора для IL-2 (CD25). Одновременное увеличение содержания клеток, экспрессирующих CD4 и CD25, позволяет предположить наличие T-reg.
Таким образом, уже через 4 часа после введения вакцины ВП-4 наблюдалось изменение фенотипа, выразившееся в нарастании содержания CD3-, CD4*- и CD8'-экспрессирующих лимфоцитов, а также маркеров активации иммунокомпетентных клеток: МНС II и CD25. Максимальные значения уровня этих маркеров, а также NK-клеток (NK1.1) отмечали через 24 часа после иммунизации, после чего происходило снижение этих показателей и через 72 часа содержание CD8- и NK-экспрессирующих клеток приходило к исходным показателям.
Увеличение соотношения CD4/CD8 (от 0,3 до 2,3) — одного из ключевых параметров иммунограммы, отражающего соотношение регуляторных субпопуляций Т-клеток, и выявленная субпопуляционная структура лимфоцитов характерна для активации иммуногенеза.
Таким образом, представленные данные позволяют говорить о том, что бактериальный иммуномодулятор, состоящий из комплекса антигенов условно патогенных микроорганизмов, вызывает активацию эффекторов врожденного иммунитета и инициирует процесс формирования адаптивного иммунитета, направленного на распознавание микроорганизмов. Возможно, развитие иммунного ответа против патогенов связано не только с распознаванием пептидов в контексте МНС II, но и МНС I. Раннее повышение содержания МНС II молекул, возможно, свидетельствует об использовании рециркуляционного пути презентации антигена, а, следовательно, поляризации Т-клеточного ответа по Thl-типу, поскольку данный путь не требует использования синтезированных de novo молекул МНС II.
При исследовании иммунофенотипа МЛ селезенки на пике интоксикации у животных (адинамия, тремор, учащение дыхания), вызванной введением более высокой дозы вакцины ВП-4 (500 мкг, внутрибрюшинно), отмечалось повышение содержания CD3'-, CD8-, МНС-экспрессирующих лимфоцитов. При этом активация иммунной системы сопровождалась резким падением уровня NK, CD4- и CD25-клеток. Вероятно, этот факт можно объяснить компенсаторным апоптозом лимфоцитов на избыточную активацию клеток иммунной системы, а также конкурентным захватом активных центров рецепторов для IL-2 в результате цитокинового перенасыщения.
Для зрелых лимфоцитов активационный апоптоз — активационно-индуцированная клеточная смерть — является способом саморегуляции силы и продолжительности иммунного ответа. Известно, что итогом активации зрелых лимфоцитов может быть как их пролиферация, клональная экспансия (позитивная активация), так и апоптоз, элиминация клеток (негативная активация). Оптимальный баланс этих процессов является одним из основных принципов функционирования иммунной системы, направленных на сохранение иммунного гомеостаза.
