Непосредственное определение мутантного аллеля гена миотонической дистрофии путем электрофоретического разделения ПЦР-продуктов может проводиться только у больных с небольшой степенью экспансии CTG-повторов (50-100 триплетов); эффективность амплификации более длинных и сверхдлинных мутантных аллелей гена DMPK недостаточна для непосредственной визуализации продуктов ПЦР при электрофорезе.
Поэтому чаще всего для прямой ДНК-диагностики миотонической дистрофии используется блот-гибридизация рестрицированной геномной ДНК или продуктов амплификации с (CTG)n- зондами [Harley H. et al., 1993; Lavedan С. et al., 1993]. При такой диагностике мутантный аллель нередко визуализируется как смазанный протяженный след на радиоавтографе, что является отражением особенностей амплификации сверхдлинных тринуклеотидных аллелей либо следствием соматического мозаицизма мутантного CTG-повтора в клетках крови [Lavedan С. et al., 1993].
Нами совместно с Институтом молекулярной генетики РАН проведена прямая ДНК-диагностика болезни в 30 российских семьях с миотонической дистрофией: экспансия тринуклеотидных CTG-повторов в одном из аллелей гена у обследованных больных выявлена более чем в 90% семей, при этом величина экспансии повторов составила от 130 до 1500 CTG-копий.
Выявление нами нормальной длины тринуклеотидного сегмента гена у небольшой части обследованных больных миотонической дистрофией соответствует наблюдениям других авторов [Thornton С. et al., 1994] и может быть обусловлено либо казуистическими случая ми точковых мутаций в гене миотонинпротсинкиназы [Harley И. et al., 1993], либо существованием других локусов, ассоциированных с данным клиническим синдромом.
Генетическая гетерогенность миотонической дистрофии была подтверждена в 1998 году: второй локус «классического» дистального фенотипа миотонической дистрофии был картирован на хромосоме 3q [Ranum L. et al, 1998]. Более того, в том же участке хромосомы 3q расположен ген особого и чрезвычайно редкого заболевания - так называемой проксимальной миотонической миопатии(PROMM) [RickerK. etal., 1999].
Предполагается, что указанные клинические синдромы (второй вариант дистальной миотонической дистрофии и проксимальная миотоническая миопатия) могут являться аллельными заболеваниями, обусловленными мутациями одного гена [Thornton С, Ashizawa T., 1999], однако подтверждение этой гипотезы станет возможным лишь после идентификации данного гена на хромосоме 3q.
