Стандартизация протокола подготовки проб воды также необходима, поскольку разные способы концентрирования образцов и экстракции генотоксикантов приводят к большим различиям в конечных результатах тестирования. Степень необходимой концентрации зависит от уровней загрязненности тестируемого образца, а также предполагаемого набора химических мутагенов в смеси.
Наименее искажающим суммарные эффекты оказались вымораживание и вакуумное испарение. При изучении мутагенности питьевой воды чаще других используются полимерные сорбенты. Стандартные протоколы подготовки проб воздуха и воды для последующей оценки суммарной мутагенности описаны отечественными авторами.
Разработка подходов к количественной оценке мутагенности суммарных загрязнений — главная и основная задача при попытках определения реальной мутагенной нагрузки на население. Одним из вариантов решения этой задачи может стать токсико-гигиенический подход, основанный, с одной стороны, на минимальных объемах тестируемых проб, давших позитивный ответ, с другой — на реальных объемах потребляемой человеком воды, пищи или вдыхаемого воздуха.
При этом можно не учесть фактор неполной экстракции генотоксикантов или их потерь в процессе подготовки проб и фактор различий в видовой и индивидуальной чувствительности лабораторного тест-объекта и человека. Тем не менее такой подход перспективен в качестве шага к оценке реальной мутагенной нагрузки на людей, поскольку в таком варианте имеется возможность суммировать эффекты, определяемые в различных компонентах среды.
Поиск главных "виновников" позитивных ответов тестирования сложных смесей затруднен по описанным выше причинам, но необходим для практических рекомендаций по улучшению качества окружающей среды с позиций содержания в ней опасных сочетаний генотоксикантов и может быть реализован проведением так называемых имитационных экспериментов на лабораторных тест-объектах с изучением различных комбинаций генотоксикантов, обнаруженных в исследуемой пробе.
Такого рода имитационное моделирование ситуаций должно основываться на уже имеющихся базах данных о механизмах мутагенного действия основных загрязнителей среды и их метаболизме. Кроме того, используемые аналитические, статистические и другие методы позволяют подтвердить предположение о потенциальных генотоксикантах в обследуемом регионе, сопоставить их концентрации с предельно-допустимыми, определить наиболее опасные сочетания генотоксикантов и источники их появления в среде.
Параллельная оценка отягощенности наследственной патологией населения данного района (изучение частоты спонтанных абортов, врожденных пороков развития, причин младенческой смертности, онкологических заболеваний, наследственных болезней, заболеваний с выраженной генетической компонентой и др.), определение ретроспективной динамики и сравнение ее с условно "контрольными" показателями, характерными для обследуемого региона, составляют суть второго подхода при генетическом мониторинге.
Следует еще раз упомянуть, что все используемые для тестирования методы и объекты дают только вероятностный прогноз мутагенности. Более того, многие мутагены видо- или тканеспецифичны и в 5—6 % вещества дают ложноположительный или ложноотрицательный ответ при использовании различных методов изучения разных биологических объектов.
В настоящее время можно определять исключительно относительную мутагенность образцов в отношении друг друга либо в отношении стандартных мутагенов или стандартизованных образцов. Одним из важных шагов на этом пути стало создание стандартных образцов разных типов загрязнителей среды (работа проводилась в рамках Международного сотрудничества по унификации методов оценки суммарных загрязнений среды), таких как обугленная пыль (SRM 1597), продукты сгорания дизельного топлива (SRM 1650), образец атмосферного воздуха современного города (SRM 1649) и др. Последний образец получен в Вашингтоне в результате непрерывного 12-месячного отбора проб.
