Производство химически инактивированных вакцин. Современные химически инактивированные вакцины.
Вакцину против клещевого энцефалита готовили из культурального вируса, инактивированного формалином после фильтрации, затем его очищали, концентрировали градиентным центрофугированием. Полученный препарат не обладал реактогенностью и обнаружил выраженную антигенность на добровольцах и иммуногенность на мышах.
В производстве инактивированных антирабических вакцин наиболее часто применяют бета-пропиолактон. Высокоиммуногенным безопасным препаратом является вакцина из концентрированного и очищенного культурального вируса бешенства, инактивированного бета-пропиолактоном (в течение 18 ч при температуре 4°С, а затем 2 ч при 37°С). Такую вакцину производили в США, Франции, Германии. Аналогичная инактивированная вакцина получена из очищенного вируса, выращенного в культуре клеток Vero. Сорбированную вакцину против бешенства для ветеринарной практики готовили из ткани мозга инфицированных мышей, крыс или из культурального вируса. Вирус инактивировали бета-пропиолактоном.
Инактивированные вакцины против эпидемического паротита менее эффективны, чем живые. Формолвакцина вызывала образование антител к HN гликопротеину и к денатурированному F-белку и по-видимому ограничивалась индукцией IgG и слабым клеточным иммунным ответом.
Вирус восточного энцефаломиелита лошадей, выращенный в суспензии свежеизолированных клеток куринного эмбриона, инактивировали формалином или бета-пропиолактоном. Наибольшим защитным эффектом для морских свинок обладала бета-пропиолактоновая вакцина.
Вирус геморрагической болезни кроликов, инактивированный формальдегидом, вызывал у привитых животных выраженный протективный эффект. Инактивация вируса бета-пропиолактоном сопровождалась менее выраженным снижением гемагглютинирующей активности и отчетливой иммуногенностью.
Вирус чумы крупного рогатого скота, инактивированный формальдегидом в сочетании с неполным адъювантом Фрейнда, индуцировал у крупного рогатого скота иммунитет продолжительностью один год.
Высокоиммуногенная эмульгированная вакцина получена из вируса болезни Ауески, инактивированного формальдегидом или глутаральдегидом. Не менее эффективные культуральные вакцины получены с использованием для инактивации вируса этиленимина или этилэтиленимина. По иммуногенной активности они не уступали живой вакцине против болезни Ауески.
Инактивированную вакцину против PC-инфекции крупного рогатого скота удалось приготовить из инфицированных вирусом клеток, обработанных глютаральдегидом. При испытании на телятах эта вакцина оказалась более иммуногенной, чем живая вакцина из аттенуированного штамма PC-вируса крупного рогатого скота и ts-мутанта PC-вируса человека. Для изготовления вакцины против лейкоза крупного рогатого скота использовали постоянную линию клеток FLK, персистентно инфицированную этим вирусом. Клетки инактивировали формальдегидом или глютаральдегидом и добавляли адъювант. Только препарат, инактивированный формальдегидом, обладал протективным действием.
Инактивация вируса катаральной лихорадки овец КЛО димером этиленимина (0,04-0,06 %; 37°С; в течение 3-5 дней) позволила получить безопасный высокоиммуногенный препарат. Повышение концентрации ДЭИ и продолжительности обработки вируса в 2—3 раза не снижало заметно его иммуногенности и гарантировало получение безопасного препарата, что свидетельствует о мягком инактивируюшем действии ДЭИ на вирус КЛО.
Формолвакцина против артеривирусной инфекции лошадей оказалась достаточно эффективным препаратом. Выраженный иммунный статус поддерживался ревакцинацией через каждые 6 мес.
Вирусы, инактивированные сернокислой медью, сохраняли антигенные и иммунногенные свойства, а также целостность вирионной ДНК.
При инактивации парвовируса свиней формальдегидом гемагглютинирующая активность практически исчезла, тогда как при инактивации ДЭИ снижалась незначительно. Однако по антигенности препараты в обоих случаях практически не различались между собой.
Один из способов повышения безопасности инактивированных вакцин на случай неполной инактивации вируса — использование аттенуированных штаммов. Классический пример этого — изготовление инактивированных вакцин из аттенуированных штаммов вируса бешенства. Иммуногенные инактивированные вакцины были получены также из аттенуированных штаммов вируса ньюкаслской болезни, парвовирусов энтерита кошек и собак, вируса болезни Ауески. Изготовление инактивированных вакцин из аттенуированных или частично аттенуированных штаммов вируса усиливает безопасность производства вакцин, что представляет большой интерес при работе с возбудителями опасных болезней.
При изготовлении инактивированных вакцин с учетом непредвиденного распространения болезней и резкого возрастания потребности в средствах специфической профилактики целесообразна разработка методов длительного хранения концентрированных вирусных антигенов при низких температурах. Создание резерва такого вирусного сырья кажется более перспективным, чем создание резерва готового продукта. Аналогичные соображения высказывались в связи с рассмотрением перспективных направлений в специфической профилактике ящура. Установлено, что инактивированная вакцина против ящура, приготовленная из вирусных концентратов, хранившихся в жидком азоте на протяжении года, обладала высокой протективной активностью.
