Липосомы в вакцинах в виде адъювантов. Характеристика липосом.
С целью замены минерального масла в адъюванте Фрейнда были предложены липосомы. Это микроскопические структуры, состоящие из одного и более концентрических липидных бислоев, окруженных водной оболочкой. Их использовали для изучения природы клеточных мембран и приняли в качестве фармакологических микрокапсул для доставки терапевтических агентов к клеткам-мишеням. Позже их стали использовать в качестве иммунологических адъювантов. Липосомы представляют собой искусственные липидные мембранные сферы, содержащие вирусный антиген.
Когда используют очищенные оболочечные белки, получают «виросомы» («иммуносомы»), напоминающие оболочку вириона без нуклеиновой кислоты. Для приготовления липосом применяют не пирогенные липиды с адъювантным действием.
Когда гликопротеины оболочки вириона смешивают с холестерином и гликозидом Квил-А, образуются сферические структуры («розетки») 40 нм в диаметре. Введение водорастворимых и липидорастворимых молекул в липосомы защищает их от разрушающего воздействия и обеспечивает доставку их к иммунокомпетентным клеткам, таким как макрофаги, с которыми они взаимодействуют. На основе количества слоев и размера липосомы делят на три класса: многослойные, большие и малые однослойные. Однослойные липосомы состоят из одной двухслойной липидной оболочки с заключенной внутри водной фазой.
Липосомы размером около 1 мкм слаботоксичны и способны увеличивать иммунный ответ к большому количеству различных антигенов. По индукции антительного ответа они превосходили вакцину с адъювантом Фрейнда и выгодно отличались тем, что не вызывали гранулем на месте введения.
Простая смесь солевого раствора антигена с липосомами не увеличивала иммуногенности. Аденовирусный антиген, включенный в многослойные липосомы, вызывал у кроликов такой IgG-ответ, как и аналогичная доза антигена с полным адъювантом Фрейнда.
Поверхностные антигены вируса гриппа А в составе липосом вызывали значительно более выраженное образование антител и повышали резистентность у привитых мышей к экспериментальному заражению. Липосомы, содержащие гликопротеины вирусов гриппа, Сендай, лесов Семлики, эффективнее индуцируют продукцию антител, чем компонентные вакцины с адъювантом.
Развитие технологии липосомных вакцин способствовало созданию Новосом - нового типа микрокапсулированных вакцин. Они не вызывают образования гранулем на месте введения, а местная реакция обычно исчезает в течение двух недель. Положительные результаты получены с липосомными вакцинами против ньюкаслской болезни и других вирусных болезней птиц. Гликопротеин вируса бешенства прикрепляли к поверхности преформированных липосом, имитируя природную структуру поверхности вириона. Приготовленные таким образом иммуносомы индуцировали строгоспецифичный гуморальный и клеточный ответ и обладали высокой протективной активностью. Антигены, ассоциированные с липосомами, оказались особенно эффективными в Т-независимом иммунитете. Липосомы нетоксичны и подвергаются биодеградации.
Они обладают низкой собственной антигенностью, обусловленной в основном фосфатидилхолином - главным компонентом большинства липосом. Липосомы, с включенными в них антигенами, вводят различными путями: внутривенно, интраперитонеально, подкожно и внутримышечно. Эффективность их зависит от способа введения. На месте введения липосом гранулемы не образуются и они могут быстро достигать дренирующих лимфоузлов. Включение вируса полиомиелита в липосомы придавало ему устойчивость к действию специфических антител и позволяло инфицировать резистентные клетки. Расширение каневого спектра и увеличение количества клеток-мишеней при использовании живых липосомальных вакцин может оказаться весьма полезным в иммунизации против многих вирусных болезней.