Методика приготовления препарата соскоба кожи с гидроксидом калия (KOH)
В дерматологии имеется ряд простых и быстро выполняемых диагностических процедур. Один из наиболее полезных диагностических методов - приготовление препарата кожных соскобов с гидроксидом калия (КОН) для исследования под микроскопом.
20% раствор КОН применяется для изменения оптических свойств кожного материала и увеличения его прозрачности. Этот метод требует практических навыков и терпения.
Первым этапом является забор материала: соскобов рыхлых чешуек на границе очага, обрезков ногтя, скопившихся под ногтем масс или небольших «перламутровых» глобул из тела моллюска. Короткие остаточные «пеньки» волос (черные точки при дерматофитии волосистой части головы) можно также безболезненно срезать с поверхности кожи скальпелем №15.
Препарат с раствором КОН.
а - небольшие чешуйки соскабливают с края очага на предметное стекло микроскопа.
б - чешуйки раздавливают для образования тонкого слоя клеток, чтобы можно было легко рассмотреть грибы
Биологический материал помещают на предметное стекло и сдвигают в центр с помощью покрывного стекла. Добавляют 1-2 капли раствора КОН и осторожно нагревают препарат над горящей спичкой или лампой микроскопа. Нельзя допускать, чтобы образец закипел, иначе он превратится в артефакт. Избыток раствора КОН удаляют с краев покрывного стекла бумажной салфеткой. Толстый слой материала будет легче рассматривать, если аккуратно, но достаточно сильно надавить на покровное стекло карандашным ластиком.
Толстые чешуйки растворятся, если их оставить в препарате на 15—20 мин.
Приготовленный препарат рассматривают под микроскопом, опустив конденсатор и лампу на нижние уровни для максимального контраста и поставив объектив на увеличение х10. Микроскоп фокусируют вверх и вниз, быстро сканируя весь препарат.
Гифы гриба представляют собой длинные, разветвляющиеся гиалиновые палочки зеленого цвета равномерной ширины, пересекающие границы эпидермальных клеток. Они часто содержат септы. Ложноположительный результат можно получить при наличии растительных волокон, неправильной интерпретации видимых границ клеток или других артефактов. В случае дрожжевой инфекции наблюдаются почкующиеся дрожжевые грибы и псевдогифы.
Тела моллюсков представляют собой овальные диски, несколько крупнее кератиноцитов, с гомогенной цитоплазмой. Во фрагментах волос грибы выглядят как мелкие круглые споры, упакованные внутри волосяного стержня или окружающие его снаружи. Гифы в препаратах волос наблюдаются крайне редко.
Препарат с раствором КОН.
а - в этом препарате гифы гриба видны как длинные ветвящиеся палочки с септами у краев и в центре чешуек
б - псевдогифы и споры, типичные для разноцветного лишая, создают картину «макарон по-флотски»