Бактериология раневого процесса. Бактериальный посев из раны
Рациональное и эффективное лечение ран у животных возможно лишь при систематическом врачебном наблюдении за состоянием раны и самого животного, проведении соответствующих лабораторных исследований отпечатков раневой поверхности, крови, мочи, экссудата и при бактериологическом контроле. В настоящее время в связи с внедрением в хирургическую ветеринарную практику сульфаниламидо-пенициллинотерапии и других биологических методов лечения возникает необходимость совместной работы хирурга, терапевта и бактериолога. Бактериологические и бактериоскопические исследования экссудата, синовиальной жидкости, мочи и крови дают клиницисту надежный объективный контроль, по которому можно судить о динамике развития патологического процесса, вирулентности возбудителей раневых инфекций, качественных сдвигах и динамике изменений микрофлоры, показаниях для применения той или иной лечебной сыворотки, об эффективности применяемых антибиотиков, химиотерапевтических и других препаратов.
Бактериолог должен не только установить ассоциацию микробов, но и выделить из него наиболее патогенный микроб, определить его чувствительность к различным лечебным препаратам, что будет иметь исключительно важное значение для выбора того или иного препарата, дозы, частоты и способа введения.
Бактериоскопия отделяемого раны обязательна перед наложением вторичного шва.
Бактериоскопическое исследование дает возможность выяснить роль микробных ассоциаций в биологии раневого процесса. Бактериологические и бактериоскопические исследования следует производить перед началом лечения и повторно по мере необходимости. Для посевов следует брать гнойный экссудат непосредственно с раневой поверхности, так как микрофлора этой последней и микрофлора гноя часто не соответствуют друг другу. Посевы гноя с раневой поверхности дают более закономерные результаты, и поэтому они имеют большое диагностическое и прогностическое значение.
Данные бактериолога при сопоставлении их с результатами лабораторных и клинических исследований дают возможность получить правильное представление о динамике изменения раневой инфекции, тяжести интоксикации, степени реактивности организма животного, состоянии его защитных резервных сил и об эффективности применяемых средств и способов лечения.
Как уже отмечалось, с целью исследования количественного и качественного состава раневой микрофлоры в раневом процессе проводится бактериологическое исследование смывов из раневого канала. Для приготовления смыва в пробирку со стерильным ватным тампоном наливают 2 мл дистиллированной воды, так, чтобы тампон находился над уровнем жидкости. Непосредственно перед взятием смыва, наклонив пробирку, увлажняют тампон. Производят им концентрический смыв из раневого канала, далее, добавляя 8 мл дистиллированной воды, отмывают тампон, получая исходное разведение 0,1. Смыв берут с площади 1 см2 из входного и выходного отверстий.
Методика посева и выделения чистой культуры. Питательные среды готовят по методике, описанной А. С. Любской в 1968 г. Пастеровской пипеткой на каждую из сред наносят по 1 капле соответствующего разведения смыва и штрихообразно рассеивают по всей поверхности среды. Все посевы инкубируют в термостате при 37 °С в течение 24 ч.
Методика изучения культуральных свойств. Изучают характер роста на питательных средах (плотных, жидких, полужидких), подсчитывают выросшие колонии. Рост микробов на плотных питательных средах просматривают через лупу. Культуральные свойства характерны для каждого вида микроба и потому являются важным диагностическим признаком. Для изучения свойств колоний микробы культивируют на 1,5—2%-ном мясопептонном агаре в чашках Петри (при этом пытаются получить изолированный рост колоний).
Колонии характеризуют по следующим признакам: величине; форме; прозрачности; контуру края; поверхности; цвету; консистенции.
Методика микроскопии выросших культур. На середину чистого, хорошо обезжиренного предметного стекла наносят каплю дистиллированной воды и в нее вносят бактериальную петлю с небольшим количеством исследуемой культуры. Окрашивают по Граму, исследуют под микроскопом с объективом 90 и окуляром 7, под иммерсией.
Методика определения патогенности микробов — дерматонекротическая проба. Из исследуемой чистой культуры, выращенной на скошенном агаре, готовят взвесь в физиологическом растворе, содержащую 2 млрд микробных тел в 1 мл, и вводят ее внутрикожно в выстриженные участки кожи кролика в дозе 0,2 мл. Результат реакции учитывают в течение 4 суток.
Реакция плазмокоагуляции. В плазму крови кролика, полученную после центрифугирования цитратной крови при 3000 мин в течение 10 мин и предварительно разведенную стерильным физиологическим раствором 1: 5, вносят бактериальной петлей 2 капли бульонной культуры и наблюдают за реакцией. Одновременно ставят контроль. Учет реакции проводят через каждый час в течение 6 ч.
Методика определения титра микробных тел в 1 мл смыва. В стерильную чашку Петри вносят 1 мл смыва и заливают мясопептонным агаром. Через 24 ч подсчитывают число колоний на агаре в чашке и полученную величину умножают на степень разведения смыва.
