Нерутинные методы пренатальной диагностики. Клетка плода в трансцервикальных образцах.
Любое хирургическое вмешательство при заборе плодного материала неизбежно сопряжено с осложнениями. Так, удаление бластомеров при ДД может вызвать замедление темпов дробления и остановку развития эмбриона на ранних стадиях. После имплантации инвазивное вмешательство с целью получения ворсинок хориона или плаценты, околоплодных вод или крови из пуповины может привести к гибели плода и спонтанному прерыванию беременности. Поэтому разработка неин-вазивных методов ПД, позволяющих избежать любых осложнений, представляется вполне оправданной.
Поиск методов получения плодного материала, исключающих хирургическое вмешательство, велся в двух направлениях. Одно из них включало изучение возможностей использования клеток плода из влагалища и цервикального канала матки беременной женщины, другое -клеток плода, циркулирующих в крови беременной женщины. Кратко рассмотрим основные достижения и недостатки этих подходов для диагностики хромосомных болезней.
Клетка плода в трансцервикальных образцах
Еще в 1971 г, было показано, что клетки трофобласта зародыша человека могут мигрировать в цервикальный канал шейки матки. Механизмы проникновения клеток трофобласта в цервикальный канал до сих пор не изучены, однако наличие клеток трофобласта в образцах цервикальной слизи было доказано различными методами, включая иммуногистохимический.
Для получения трансцервикальных образцов в сроки беременности 6—15 нед предложено несколько способов — соскобы и смывы со стенок канала, аспирация цервикальной слизи. В зависимости от способа получения образцы в большей или меньшей степени контаминированы клетками материнских тканей, при этом эмбриональные клетки, представленные клеточными элементами плацентарных тканей, составляют около 30—50% клеточного состава.
Для исследования полученного образца используется комплексный подход, включающий ПЦР для анализа высокополиморфных STR и FISH с прицентромерными пробами на нативных клетках и после кратковременного культивирования, которое позволяет провести кариотипирование.
Использование трансцервикальных образцов не нашло широкого применения в клинической практике. В основном это обусловлено методическими трудностями работы с заведомо контаминированными образцами, что резко снижает диагностическую ценность этого подхода. Одни исследователи продемонстрироваливысокую эффективность получения материала и его анализа для определения пола плода и распространенных анеуплоидий. другие получили результат лишь в 44% случаев, Кроме того, до сих пор не определен риск осложнений после процедуры получения плодного материала, так как все исследования были проведены непосредственно перед абортом. Редкие случаи анализа трансцервикальных образцов при прогрессирующей беременности были дополнены традиционными методами ПД, и следовательно, не позволили оценить риск прерывания беременности, что имеет принципиальное значение для внедрения метода в медицинскую практику.